辅酶Ⅰ(NAD+/NADH)含量检测试剂盒 ; 50T/24样
测定原理：
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和 NADH，NADH通过 PMS 的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲䐶（Formazan），在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH，进一步采用 MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1mL比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成与配制：
试剂
规格
储存条件
酸性提取液
50mL×1瓶
4 °C
碱性提取液
试剂一
15mL×1瓶
试剂二
4mL×1瓶
试剂三
粉剂×1瓶
-20 °C
试剂三溶液配置：用时加入 4mL 蒸馏水，混匀，用不完的试剂在 4 °C 保存一周
试剂四
试剂四溶液配置：用时加入 4mL 蒸馏水，混匀，用不完的试剂在 4 °C 保存一周
试剂五
1.8mL×1瓶
试剂六
30mL×1瓶
试剂七
NAD+和NADH提取：
详见试剂盒内说明书关于样本处理的说明。测定组织、细菌和细胞时需要测定蛋白浓度。
可用总蛋白定量测试盒（考马斯亮蓝法）或者总蛋白定量测试盒(BCA法)进行蛋白浓度的测定。
检测步骤：
测定管
对照管
样品(μL）
50
试剂一(μL）
250
试剂二(μL）
75
试剂三( μL）
试剂四(μL）
试剂五(μL）
35
试剂六(μL）
500
混匀，室温避光静置20 min
试剂七(μL）
1000
混匀，波长570nm处，1cm光径比色皿，蒸馏水调零，测定各管吸光值。
