欢迎您来到源桔生物!

电话:021-54479081

本公司产品仅供科研使用,不用于人体及临床诊断!
销售一部:15216759556,销售二部:15921990938,销售三部:19946122371,销售四部:13524933321,销售五部:13641951130,销售六部:17740839645
产品分类:
更多
辅酶Ⅱ(NADP+/NADPH)含量检测试剂盒 ; 50T/24样

辅酶Ⅱ(NADP+/NADPH)含量检测试剂盒 ; 50T/24样

  • 货号:YJ49146
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:比色法
  • 分类:氧化与抗氧化系列
  • 规格:50T/24样
  • 用途:仅供科研使用
  • 咨 询 客 服 下载说明书
品牌 货号 纯度/规格 价格 库存 包装
源桔生物 YJ49146 50T/24样 ¥810 大量 液体盒装
  • 商品详情

辅酶Ⅱ(NADP+/NADPH)含量检测试剂盒 ; 50T/24样

测定原理:

分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP+和NADPH。NADPH 通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原 NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。

仪器设备(自备):

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成:(50T/24样):

酸性提取液:50ml ×1瓶,4℃保存;

碱性提取液:50ml ×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体15 ml ×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1支,-20 ℃保存,用时加入4ml 蒸馏水,混匀;用不完的试剂4℃保存一周;

试剂三:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入4ml蒸馏水,混匀;用不完的试剂4℃保存一周;

试剂四:粉剂×1支,4℃保存,用时加入4ml蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;

试剂五:液体1.8ml×1支,4℃保存;

试剂六:液体30ml×1瓶,4℃保存;

试剂七:液体50ml×1瓶,4℃保存。

操作步骤:

(一)NADP+和NADPH的提取:

详见试剂盒内说明书关于样本处理的说明。测定组织、细菌和细胞时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。

(二)测定步骤:(在 1.5ml  棕色 EP 管中按下表依次加样,反应过程需要避光):

试剂名称(μl)

对照管

测定管

样本

50

50

试剂一

250

250

试剂二

75

75

试剂三

75

75

试剂四

75

75

试剂五

35

35

试剂六

 

混匀,室温避光静置20min

试剂六

 

500

试剂七

1000

1000

充分混匀 ,静置5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,波长 570nm,

光径 1cm,双蒸水调零测定对照吸光值A1和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。

注:对照管试剂五加完后必须马上加入试剂六,而测定管加完试剂五之后必须反应20min 后再加试剂六。