钙调神经磷酸酶(CaN)检测试剂盒 ; 50管/24样
试剂组成与配制：
试剂组成
试剂装量
保存条件
试剂一
缓冲液
3ml ×1支
4℃保存 6个月
试剂二
粉剂
粉剂×1支
稀释液
1.5ml ×1支
4℃保存 12个月
试剂二应用液配制：取 R2 粉剂加入到 R2稀释液中，溶解完全后待用，4℃保存 3个月
试剂三
贮备液
0.015ml ×1支
–20℃以下保存 3个月
0.15ml ×1支
4℃保存
试剂三应用液配制：按试剂三贮备液：试剂三稀释液=1:10的比例配制，现配，用多少配多少，余下继续–20℃以下可保存 3天。
试剂四
终止剂
0.6 ml ×1支
4℃保存6个月
试剂五
甲液
7ml ×2瓶
4℃避光保存 6个月
乙液
6ml ×2瓶
显色剂配制：用时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好的试剂五乙液中，充分混匀，需提前0.5小时配制，4℃保存至少可保存 5天；如您的样本量很少，可按试剂五甲液：试剂五乙液＝7 ︰ 6的比例进行配制，需多少配多少（按比例配制显色剂时要防止磷污染，最好用新的一次性吸嘴或是专用吸嘴）
试剂六
稳定剂
30ml ×1瓶
试剂七
10mmol/L标准品贮备液
1ml ×1瓶
0.1mmol/L 标准应用液配制：用时将试剂七标准磷贮备液 100 倍稀释，现用现配。
1、酶促反应
对照管
测定管
试剂一缓冲液(μl）
60
试剂二底物液(μl）
25
试剂三应用液(μl）
3
待测样本(μl）
混匀，37℃水浴 20min
试剂四终止剂(μl）
12
样本(μl）
混匀，离心3500转/分，离心10 分钟，取上清50μl 定磷。
2、定磷：
空白管
标准管
双蒸水(μl）
50
0.1mmol/L标准应用液(μl）
测定管上清(μl）
对照管上清(μl）
试剂五显色剂(μl）
500
混匀，静置 2 分钟
试剂六稳定剂(μl）
混匀，室温静置 5分钟，636nm 处，0.5cm光径，双蒸水调零测各管吸光度OD值。
三、计算及举例：
1、定义：
规定每小时每毫克蛋白的钙调神经磷酸酶（CaN）分解底物PNPP产生1μmol无机磷的量为一个CaN的活力单位。
2、计算公式：
