还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒/96T
测定原理：
二硫代二硝基苯甲酸与巯基化合物反应时能产生一种黄色化合物，可进行比色定量测定。
试剂组成与配制：
试剂一：甲粉×1瓶，乙液50ml×1瓶，4℃保存 6个月。甲粉：加90～100℃的热双蒸水170ml，充分完全溶解；
试剂一应用液的配制：将已配好的甲液与乙液充分混合。此为过饱和溶液，室温静置冷却后，如有结晶，则取上清进行实验，室温保存6个月。
试剂二：粉剂×1瓶，用时加双蒸水至200ml溶解，用我所赠送的塑料瓶室温保存6个月。
试剂三：粉剂×1支，用时加双蒸水至50ml溶解，避光4℃保存6个月。
试剂四：粉剂×4支，用时每支加双蒸水 10ml 溶解，避光冷藏可保存5天。
试剂五：GSH标准品粉剂 3.07mg×3支，4℃保存 6个月。
试剂六：GSH标准品溶剂贮备液 10ml×1瓶，4℃保存 6个月。
GSH标准品溶剂应用液的配制：按 GSH标准品溶剂贮备液:双蒸水=1:9,加入9倍体积的双蒸水进行稀释，现用现配。
1mmol/L GSH 标准品溶液的配制：GSH 的分子量为307，每次测定前将3.07mg 的 GSH标准品加入到 10ml的 GSH标准品溶剂应用液中，混匀，现用现配。
20μmol/L GSH标准品溶液的配制：取1mmol/LGSH标准品溶液0.2ml加入GSH标准品溶剂应用液9.8ml, 现用现配。
操作步骤：
1、上清液的制备：取待测样本0.5ml,加试剂一应用液2ml混匀，3500～4000转/分离心10分钟，取上清液1ml进行显色反应。
2、显色反应：
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
试剂一应用液(ml） | 1.0 | | |
20μmol/LGSH标准品(ml） | | 1.0 | |
上清液(ml） | | | 1.0 |
试剂二(ml） | 1.25 | 1.25 | 1.25 |
试剂三(ml） | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
试剂四(ml） | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
混匀，静置5分钟，420nm处，1cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。 |
注意事项：
1、血液中的GSH几乎全部存在于红细胞内，可以用每升全血中GSH的克数来表示，也可用每克Hb中GSH的含量来表示。
2、计算时应用消光系数，故比色计要校正波长。用标准管计算较方便、准确。
3、吸取上清时，最好用带刻度的5ml滴管，或者用移液器，避开表面的一层薄膜，插到上清液中吸取2ml做显色反应。
4、最好每批试验做2个标准管、空白管，以减少操作误差。
测定意义：
谷胱甘肽（GSH）是一种低分子清除剂，它可清除 O2- 、H2O2 、LOOH。谷胱甘肽是谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种三肽，是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物，并且是GSH—PX和GST两种酶类的底物，为这二种酶分解氢过氧化物所必需，它并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤，最近还证明GSH也参与使维生素E恢复到还原态的作用，缺乏或耗竭GSH会促使许多化学物质或环境因素产生中毒作用或加重其中毒作用，这可能与增加氧化损伤有关，因而GSH的量的多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素。
