碱性磷酸酶(ALP/AKP)检测试剂盒/96T
测定原理:
碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与 4-氨基安替吡啉作用经铁氰化钾氧化生成红色醌衍生物,根据红色深浅可以测定酶活力的高低。
试剂盒组成与配制:
组份
96T
保存条件
试剂一
缓冲液
6ml×1瓶
4℃冷藏保存6个月
试剂二
基质液
4℃冷藏保存3个月
试剂三
显色剂
18ml×1瓶
试剂四
1.1mg/ml酚标准贮备液
0.5ml×1支
0.1mg/ml 酚标准应用液配制:1.1 mg/ml 酚标准贮备液﹕蒸馏水=1﹕10 稀释,现用现配
操作表:
空白孔
标准孔
测定孔
双蒸水(μl)
5
0.1mg/ml 酚标准应用液(μl)
待测样本(μl)
缓冲液(μl)
50
基质液(μl)
充分混匀 37℃水浴15分钟
显色剂(μl)
150
立即混匀,520nm,0.5cm 或者1cm 光径比色,空白管调零,测各管吸光度。
计算公式:
1、血清计算公式:(适用于培养液、血清、血浆等液体样本的计算)
定义:100ml血清或液体在37℃与基质作用15分钟产生1mg酚为1个金氏单位。
2、组织计算公式:(适用于培养细胞、组织等相关样本的计算)
定义:每克组织蛋白在 37℃与基质作用15分钟产生1mg酚为1个金氏单位。