碱性磷酸酶(ALP/AKP)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理:
碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与 4-氨基安替吡啉作用经铁氰化钾氧化生成红色醌衍生物,根据红色深浅可以测定酶活力的高低。
试剂组成与配制:
试剂一:缓冲液,30ml×1瓶,4℃冷藏保存3个月。
试剂二:基质液,30ml×1瓶,4℃避光保存3个月。
试剂三:显色剂,90ml×1瓶,4℃避光保存3个月。
酚标准贮备液:0.5ml×1瓶,4℃避光保存3个月,浓度为1.1mg/ml。
0.1mg/ml酚标准应用液配制:1.1 mg/ml酚标准贮备液﹕双蒸水=1﹕10 稀释,现用现配
操作过程:
(一)、血清(浆)中AKP的测定:
1、操作表:
空白管
标准管
测定管
双蒸水(ml)
0.05
0.1mg/ml酚标准应用液(ml)
血清(ml)
缓冲液(ml)
0.5
基质液(ml)
充分混匀 37℃水浴15分钟
显色剂(ml)
1.5
立即混匀,520nm ,0.5cm 或者 1cm 光径比色,空白管调零,测各管吸光度。
注:鸡血清(浆)中AKP活力较高,一般需要用生理盐水5 倍或10倍稀释后待测
2、单位定义:
100ml血清在 37℃与基质作用15分钟产生1mg 酚为1个金氏单位。
3、计算公式: