碱性磷酸酶(ALP/AKP)检测试剂盒/48T
测定原理:
碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉作用经铁氰化钾氧化生成红色醌衍生物,根据红色深浅可以测定酶活力的高低。
试剂盒组成与配制:
组份
48T
保存条件
试剂一
缓冲液
3ml ×1瓶
4℃冷藏保存 6个月
试剂二
基质液
4℃避光保存 3个月
试剂三
显色剂
9ml ×1瓶
试剂四
1.1mg/ml酚标准贮备液
0.5ml ×1支
0.1mg/ml 酚标准应用液配制:1.1 mg/ml 酚标准贮备液﹕蒸水=1﹕10稀释,现用现配
操作表:
空白孔
标准孔
测定孔
双蒸水(μl)
5
0.1mg/ml 酚标准应用液(μl)
待测样本(μl)
缓冲液(μl)
50
基质液(μl)
充分混匀37℃水浴 15分钟
显色剂(μl)
150
轻轻振摇孔板混匀,波长520nm,酶标仪测定各孔吸光度 OD 值。
计算公式:
1、血清计算公式:(适用于培养液、血清、血浆等液体样本的计算)
定义:100ml血清或液体在37℃与基质作用 15 分钟产生1mg 酚为1个金氏单位。
2、组织计算公式:(适用于培养细胞、组织等相关样本的计算)
定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15分钟产生1mg酚为1个金氏单位。