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磷酸果糖激酶(PFK)检测试剂盒 ; 50T/48样

磷酸果糖激酶(PFK)检测试剂盒 ; 50T/48样

  • 货号:YJ49184
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:紫外比色法
  • 分类:氧化与抗氧化系列
  • 规格:50T/48样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ49184 50T/48样 ¥2250 大量 液体盒装
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磷酸果糖激酶(PFK)检测试剂盒 ; 50T/48样

测定原理: 

PFK 催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成 NAD+,在340 nm下测定NADH下降速率,即可反应PFK活性。

自备仪器用品:

离心机、紫外分光光度、水浴锅、1ml石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:60ml×1瓶, 4℃保存

试剂一:40ml×1瓶,4℃保存

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存,临用前加2.8ml蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存不能反复冻融

试剂三:粉剂×1支,4℃保存,临用前加0.26ml蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存不能反复冻融

试剂四:液体×1支,4℃保存,临用前加0.26ml蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存不能反复冻融

样品前处理:

样本提取详见试剂盒内说明书。测定组织和细胞需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。

测定步骤:

试剂名称(μl)

测定管

工作液

800

样本

30

试剂三

5

试剂四

5

将上述试剂按照顺序加入1ml石英比色皿中,立即混匀,加试剂四的同时△开始计时,记录在 340nm波长下 20秒时的初始吸光度 A1和10分 20 秒时的吸光度 A2,计算A =A1-A2