磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)检测试剂盒 ; 50T/48样
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和二氧化碳生成草酰乙酸和磷酸氢离子，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm测定NADH减少速率，从而计算PEPC活性。
自备仪器用品：
台式离心机、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液: 60ml×1瓶, 4℃保存
试剂一: 30ml×1瓶，4℃保存
试剂二: 10ml×1瓶，4℃保存
试剂三: 粉剂×1支，-20℃保存，临用前加8ml蒸馏水充分溶解，用不完的试剂4℃保存一周
试剂四: 粉剂×1支，-20℃保存，临用前加5ml蒸馏水充分溶解，用不完的试剂4℃保存一周
试剂五: 20μl原液×1支，4℃保存
试剂五: 10ml稀释液×1瓶，4℃保存
样品前处理：
样本提取详见试剂盒内说明书。测定细菌、组织和细胞时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒（考马斯亮蓝法）或者总蛋白定量测试盒(BCA法)进行蛋白浓度的测定。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min 以上，调节波长到340nm，用蒸馏水调零。
2、试剂五工作液的配置：将试剂五原液：试剂五稀释液=1:329 稀释，用多少配多少。
3、将试剂一、二、三、四和试剂五工作液置于37 °C（哺乳动物）或 25 °C（其他物种）预热5分钟。
4、加样表
试剂名称(μl）
测定管
试剂一
500
150
95
试剂五工作液
样本
20
将上述试剂按照顺序加入1ml 石英比色皿中，立即混匀，加△样本的同时开始计时，记录在 340nm 波长下的初始吸光度A1和 5 分钟后的吸光度A2，计算 A =A1-A2。
