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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)检测试剂盒 ; 50T/48样

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)检测试剂盒 ; 50T/48样

  • 货号:YJ49186
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:紫外比色法
  • 分类:氧化与抗氧化系列
  • 规格:50T/48样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ49186 50T/48样 ¥5520 大量 液体盒装
  • 商品详情

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)检测试剂盒 ; 50T/48样

测定原理: 

PEPCK催化草酰乙酸反应生成磷酸烯醇式丙酮酸与二氧化碳,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步催化 NADH生成NAD+,在340nm测定NADH减少速率,从而计算PEPCK活性。

自备仪器用品:

台式离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液  60ml×1瓶, 4℃保存

试剂一  45ml×1瓶,4℃保存

试剂二  液体 41μl×1瓶,4℃保存

试剂三  粉剂×1支,-20℃保存

试剂四  粉剂×1 支,-20℃保存

工作液的配置:临用前将试剂二和试剂三转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂 4℃保存一周。

试剂四的配制:临用前加入2.5ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存一周

样品前处理:

样本提取详见试剂盒内说明书。测定细菌、组织和细胞时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。

测定步骤:

试剂名称(μl)

测定管

样本

50

试剂四

50

工作液

900

将上述试剂按照顺序加入1ml石英比色皿中,立即混匀,加样本的同时开始计时,记录在 340nm 波长下的初始吸光度 A1和 1分钟后的吸光度 A2,计算△A=A1-A2