内源性一氧化碳(CO)检测试剂盒 ; 100管/50样
实验仪器:
试管、微量移液器、旋涡混匀器、可见分光光度计(568和581nm)。
适用范围:
本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中内源性一氧化碳;
测定意义:
一氧化碳(carbon monoxide ,CO)是与一氧化氮(NO)极相似的小分子气态物质。90年代以来的大量研究揭示,生物体内源性CO不仅作为一种新型的神经递质参与中枢神经系统的信息传递,还具有舒张血管、抑制血管平滑肌和血管内膜增殖、抑制血小板聚集、调节体内激素分泌、抑制细胞凋亡等多种生物学功能,在机体多种生理及病理状态中发挥重要的作用。
操作过程:
1、血清(浆)中血红蛋白Hb测定及计算:
取0.05ml样本(血清 、血浆)与2.5ml的血红蛋白测定应用液(即将试剂五的浓缩液进行100倍稀释),混匀,静置5分钟后,1cm光径蒸馏水调零,540nm测定各管吸光度值。
2、样本前处理:
①、制备溶血液:取抗凝全血0.01ml,加入试剂一溶血剂1.2ml混匀,静置5分钟,使溶血完全。
②、制备测定样本:取制备好的溶血液0.1ml,加待测血浆0.1ml,混合后制备成测定样本。
③、制备对照样本:取制备好的溶血液0.1ml,加双蒸水0.1ml,混合后制备成对照样本。
3、血清(浆)中碳氧血红蛋白测定:
加入物 | 测定管 | 对照管 |
经过前处理的血浆测定样本(ml) | 0.2ml | |
经过前处理的血浆对照样本(ml) | | 0.2ml |
试剂三 碳氧血红蛋白测定工作液(ml) | 2.3ml | 2.3ml |
混匀,静置10分钟后,试剂二缓冲液调零,1cm光径,分别测各管568nm与581nm的吸光度,计算每只样本的绝对吸光度值。 |
计算公式:
〇 碳氧血红蛋白百分浓度(HbCO%)的计算:
通过分别测定568nm 581nm的吸光度,计算△OD(A568-A581)的绝对吸光度值差。再由标准曲线,通过回归方程计算出碳氧血红蛋白百分比浓度,即HbCO%x 即为△OD(A568-A581)的绝对吸光度值,y 即为碳氧血红蛋白百分比浓度HbCO%=[ 0.822×△OD(A568-A581)+0.001 ]×100%
〇 血清/血浆中Hb的测定步骤及计算公式:
血红蛋白含量的计算:血红蛋白克数/升= 540nm处吸光度值×73.54
〇 血浆中一氧化碳(CO)含量的计算公式:
绝对吸光度△OD值=测定管△OD(Ase-As)一对照管△OD(Ases-As)通过回归方程计算HbC0%=[0.822X绝对吸光度△0D值+0.001]X100%

【注】64546为Hb分子量;4表示一个Hb结合四个CO