柠檬酸(CA)含量检测试剂盒 ; 50T/48样
测定原理:
酸性条件下,柠檬酸还原 Cr6+生成 Cr3+,Cr3+在545nm 处有特征吸收峰;通过测定 545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。
自备实验用品及仪器:
水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4 。C保存;
试剂二:液体×1瓶,4 。C保存;
试剂三:液体×1支,-20 。C保存;
试剂四:粉剂×1瓶,室温保存;临用前加入5ml试剂一,充分溶解;
试剂五:液体×1瓶,4 。C避光保存;
标准品:液体×1支,250μmol/L柠檬酸标准液,4。C保存。
柠檬酸提取:
样本提取详见试剂盒内说明书。测定组织和细胞需要另取组织测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA法)进行蛋白浓度的测定。
测定操作表:
空白管
标准管
测定管
蒸馏水(μl)
100
标准液(μl)
上清液(μl)
试剂一(μ l)
700
试剂四(μl)
试剂五(μl)
混匀,室温静置 30min ,1ml 玻璃比色皿,545nm,蒸馏水调零,测定各管 A545。