苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理：
苹果酸脱氢酶（Malate Dehydrogenase, MDH）催化的氧化还原反应伴随着340nm 处吸光度的降低，通过测定每分钟吸光度的变化来计算苹果酸脱氢酶的活力。
试剂盒组成与配制：
| 试剂组成 | 试剂装量 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 | 12ml×5瓶 | -20℃保存 6个月 |
试剂二 | 粉剂 | 粉剂×2支 | -20℃保存 6个月 |
| 稀释液 | 0.5ml×2支 | -20℃保存 6个月 |
试剂二应用液的配制: 临用前将1支2号稀释液融化后加入到1支 2号粉剂中，充分混匀后即为试剂二应用液，现用现配。 |
试剂三 | 粉剂 | 粉剂×5支 | -20℃保存 6个月 |
| 稀释液 | 1ml×5支 | -20℃保存 6个月 |
试剂三应用液的配制: 临用前将1支3号稀释液融化后加入到1支3号粉剂中，充分混匀即为试剂三应用液，备用。 |
工作液的配制: 按试剂一︰试剂二应用液︰试剂三应用液＝60︰1 ︰ 5 的比例进行配制,用多少配制多少,现用现配 |
操作步骤：
1、10%匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆,2500/分,离心10分钟，取上清液进行测定。
2、参考取样浓度：肝脏匀浆一般为0.2％；肌肉匀浆一般为0.5％(建议先做预实验确定)。
操作过程：
a、将紫外分光光度计于340nm处,0.5cm光径石英比色皿, 以双蒸水调零 (石英比色皿
准备两只,一只用于调零,一只用于测定)。
b、将工作液，37℃预温3分钟以上。
c、往相应编号的试管中加入50μl待测样本，取1ml工作液迅速冲入试管中，立即混匀并计时。(空白管取50μl双蒸水,加入1ml工作液,其它操作与测定相同)
d、迅速倒入石英比色皿中在紫外分光光度计 340nm处比色，20秒时读取吸光度值（A1 值）,在1分20秒时再次测定吸光度值（A2值）；
e、求出2次吸光度差值(△A=A1-A2）。
[注]：空白管只须做 1～2只 (空白OD很稳定)
若△A测定/分＜0.05则需加大样本的浓度；否则影响检测结果。
若△A测定/分＞0.3，则需将样本的浓度稀释后再测；否则影响检测结果。
请在批量检测前一定要取正常对照组样本做此样本最佳浓度的预试。
计算公式：
1、定义：每毫克组织蛋白在本反应系统中1分钟内催化1μmol的底物转变成产物定义为1个酶活力单位。
2、计算公式：
测定管△A：20秒时测定管的吸光度OD减去1分20秒时的测定管吸光度OD；
空白管△A：20秒时空白管的吸光度OD减去1分20秒时的空白管吸光度OD。
