葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)检测试剂盒 ; 100管/30样
测定原理:
正常血红蛋白是亚铁血红蛋白,可被氧化成为高铁血红蛋白,当红细胞内G-6-PD含量正常时,通过戊糖代谢旁路形成的 NADPH可作为血液中高铁血红蛋白还原酶的辅酶,并在递氢体的参与下,高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。当红细胞内缺少G-6-PD时,高铁血红蛋白不能被还原,通过测定高铁血红蛋白的吸光度,可算出G-6-PD 的活力高低。
试剂盒组成与配制:
试剂一:液体3ml×1瓶,室温保存6个月。
试剂二:粉剂甲×1支,粉剂乙×1支,4~8℃保存6个月。
试剂二应用液的配制: 用时将甲粉剂倒入乙粉剂中,再加双蒸水10ml混匀,充分溶解后于 4℃~8℃保存。
试剂三:贮备液 80ml×2瓶,4~8℃保存6个月。
试剂三应用液的配制:用时贮备液:双蒸水=1:9稀释配成应用液,4~8℃保存。
试剂四:葡萄糖粉剂2支,生理盐水30ml×1瓶,4~8℃保存6个月。
葡萄糖液的配制:用时每支粉剂加生理盐水3ml,溶解后冷冻保存(-20℃) , 以防霉变。
操作步骤:
(一)、样本前处理:
1、抽取静脉血2ml,用肝素抗凝或3.8%柠檬酸钠溶液抗凝,加葡萄糖液20l。
2、将此标本离心沉淀1000转/分钟,离心 5分钟,待红细胞下沉后吸去部分血浆,使红细胞与血浆比例为 1:1,摇匀备用。
(二)、操作表:
| 测定管 | 对照管 | 空白管 |
处理好的全血(ml) | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
试剂一(ml) | 0.01 | | |
试剂二应用液(ml) | 0.01 | 0.01 | |
双蒸水(ml) | | 0.01 | 0.02 |
充分混匀,与空气中的氧气充分接触,加塞*置37℃,水浴3小时。保温后,请再充分混匀后进行下面的操作。 |
保温好的混合液(ml) | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
试剂三应用液(ml) | 5 | 5 | 5 |
充分混匀,2分钟后3000转/分钟,离心10分钟,取上清在640nm处,1cm光径,双蒸水调零比色,测各管的吸光度。 |
计算公式:
