前列腺酸性磷酸酶(PACP)检测试剂盒 ; 50管/25样
测定原理:
酸性磷酸酶ACP催化α-萘酚磷酸盐水解,产生α-萘酚和无机磷酸盐;α-萘酚与重氮盐反应生成有色偶氮化合物,在530nm处比色测定,通过计算可测出酶的活力。ACP分成可被酒石酸抑制的ACP及不被酒石酸抑制的ACP(非PACP), 同一份样本若用含酒石酸与不含酒石酸的两种底物测定,二者测定值之差代表前列腺 ACP(PACP)的活力。
试剂组成与配制:
试剂一:液体15ml×1瓶,4℃保存3个月,若出现结晶加热溶解即可。
试剂二:贮备液15ml×1瓶,4℃保存。
试剂二应用液的配制:按贮备液︰双蒸水=1︰9的比例进行配制,配好后4℃保存。
试剂三:粉剂×1支,用时每支粉剂加试剂二应用液60ml ,4℃保存。
试剂四:粉剂×1支,4号稀释液60ml×1瓶,用时1支粉剂加60ml 4号稀释液,配成4号
应用液。4号应用液4℃避光保存。
试剂五:液体60ml×1瓶,室温保存。
操作步骤:
1、样本前处理:
①、血清(浆)样本:血清(浆)直接加样,样本 4℃存放最好当天检测,如来不及可-20℃以下冷冻保存,温度越低存放时间越长。(采血时必须避免溶血)
②、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1 :9 的比例,加入9 倍体积的生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,制成10%的匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液进行测定。
2、操作表:
| 测定管 | 对照管 |
样本(ml) | a* | a* |
试剂一(ml) | | 0.25 |
试剂二应用液(ml) | 0.25 | |
试剂三(ml) | 0.5 | 0.5 |
混匀,37℃准确反应15分钟 |
试剂四(ml) | 0.5 | 0.5 |
混匀,37℃准确反应10分钟 |
试剂五(ml) | 1.0 | 1.0 |
混匀,室温静置5分钟,530nm,1cm光径,双蒸水调零测各管吸光度。*参考取样量:血清(浆)取100μl,10%组织匀浆取100μl。 |
活力的计算:

[ 注 ]* 呈色物微摩尔消光系数为12.8×10-3L · μmol-1·cm-1
(二)、组织匀浆中PACP活力的计算:
1、定义:每克组织蛋白在37℃与底物作用,每分钟产生1μmol的游离酚为一个活力单位。
2、计算公式:

[ 注 ]* 呈色物微摩尔消光系数为12.8×10-3L·μmol-1·cm-1 **gprot/L为克蛋白/升