乳酸(LD)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理：
以NAD+为氢受体，LDH催化乳酸(Lactic Acid )脱氢产生丙酮酸，使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
试剂组成及配制：
蛋白沉淀剂：
溶液50ml×1瓶，室温保存6个月，如有结晶，则取上清进行实验。
试剂一：酶稀释液60ml×1瓶，4℃~8℃冰箱保存 6个月。
试剂二：酶贮备液0.6 ml×1支, 4℃~8℃冰箱保存6个月；用时用一次性吸头进行取样。
酶工作液的配制：临用前将试剂二（酶贮备液）和试剂一（酶稀释液）按照1 ︰ 100的体积比进行混合，现用现配，4℃保存 24小时内有效；
试剂三：显色溶液 6 ml×2瓶，4℃~8℃避光冰箱保存 6个月。
试剂四：粉剂×2支，短期内使用可放 4℃~8℃冰箱，长期（6个月）存放请置-20℃以下。显色剂的配制：使用前取试剂四粉剂1支倒入1瓶试剂三液体中，待粉剂全部溶解后，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复 2～3次，使二者充分混合，配成显色剂，4℃~8℃冰箱避光保存。
试剂五：终止液，60 ml×2瓶，4℃~8℃冰箱保存 6个月。
试剂六：3mmol/L标准液，2 ml×1支，4℃~8℃冰箱保存 6个月。
操作步骤：
1、前处理：
上清液制备：取待测样本0.1ml,加入蛋白沉淀剂0.6ml混匀，3500～4000转/分，离心10分钟，取上清液进行测定。
[注]：
1、全血及时用蛋白沉淀剂制备成乳酸上清液。
2、制成的乳酸上清冰箱4℃或者 0℃以下保存，15～30天稳定不变。
3、如果您的血样很少，您可以取0.05ml全血加0.3ml蛋白沉淀剂。
操作表：
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
双蒸水(ml） | 0.02 | | |
3mmol/L标准液(ml） | | 0.02 | |
上清液(ml） | | | 0.02 |
酶工作液(ml） | 1 | 1 | 1 |
显色剂(ml） | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
混匀，37℃水浴准确反应10分钟 |
终止液(ml） | | 2 | 2 |
混匀，530 nm，1cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。 |
注意点：
1、应取空腹或静止状态下的静脉血，并避免血液淤滞，如用止血带，应在针头刺入静脉后马上放开，然后等 2 分钟后再抽血。
2、血液要新鲜，最好是当天完成，如果当天完不成，可将样本进行样本前处理后，将上清液 4℃或-20℃保存可稳定 15～30 天。
3、蛋白沉淀剂如有结晶, 则取上清进行实验。
4、在批量实验前需要进行预实验，以确定测定绝对OD（测定 OD 值-空白 OD 值）在 0.05～0.35之间。如果测定绝对OD小于 0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对 OD大于0.35，则需要将样本稀释后重新测定。
1、前处理：
将6mmol/L的乳酸标准用双蒸水稀释成不同浓度：1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L、 6mmol/L，进行标准曲线的制备。
2、操作表：
| 空白管 | 标准管 |
双蒸水(ml） | 0.02 | |
不同浓度的标准液(ml） | | 0.02 |
酶工作液(ml） | 1 | 1 |
显色剂(ml） | 0.2 | 0.2 |
混匀，37℃水浴准确反应10分钟 |
终止液(ml） | 2 | 2 |
混匀，530nm ，1㎝光径，双蒸水调零，测各管吸光度值。 |
3、测定结果：
乳酸标准浓度（mmol/L） | 测定OD值 | 绝对OD值 |
0 | 0.076 | 0 |
1 | 0.174 | 0.098 |
2 | 0.281 | 0.205 |
3 | 0.384 | 0.308 |
4 | 0.478 | 0.402 |
5 | 0.558 | 0.482 |
6 | 0.633 | 0.557 |
4、绘图如下：
