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髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒 ; 100管/48样

髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒 ; 100管/48样

  • 货号:YJ49217
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:比色法
  • 分类:氧化与抗氧化系列
  • 规格:100管/48样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ49217 100管/48样 ¥748 大量 液体盒装
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髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒 ; 100管/48样

测定原理: 

中性白细胞中存在有髓过氧化物酶,每个细胞所含的酶的量是一定的,约占细胞干重的 5%,该酶具有使过氧化氢还原的能力,利用这一特点可以分析酶的活力,并定量测定中性白细胞的数目。

其原理如下: 

MPO+H2O2→复合物;复合物+AH2(供氢体)→H2O+MPO+A产物

通过供氢体邻连茴香胺供氢后生成黄色化合物,在460nm处通过比色测定A产物的生成量,从而推算出MPO的活力及H2O2 减少的量和白细胞的数目。

试剂组成与配制:

试剂一:缓冲贮备液35ml×1瓶,按需要量配成缓冲应用液,4℃保存 6个月。

缓冲应用液的配制:贮备液:双蒸水=1:9 ,4℃保存1个月。

试剂二:粉剂×2支,4℃保存6个月。临用时每支加缓冲应用液60ml溶解,可以 37℃加热溶解,4℃保存 2周。

[注]:若您所需测的是组织样本,并且除髓过氧化物酶之外,还需测其它项目时,此时每支试剂二粉剂需配成浓缩一倍的溶液,即每支试剂二粉剂加到缓冲应用液 30ml 中。

试剂三:粉剂×3支,溶剂 6ml×3支,4℃保存 6个月。用时1支粉剂倒入1支溶剂中溶解,最好提前一天配制,充分溶解后 4℃保存2周。

试剂四:溶液 24ml×1  瓶,天冷时会凝固,用前放入 37℃以上的水中摇晃使其溶解至透明 后方可应用,室温保存6个月。

试剂五:粉剂×2支, 4℃保存6个月。

试剂六:溶液 0.5ml×1支,4℃保存 6个月。

显色剂的配制:临用时将试剂五粉剂1支加到100ml缓冲应用液中,充分摇匀,待粉剂完全溶解后再加入试剂六 0.1ml,充分混匀,配好后的显色剂 4℃避光保存。

试剂七:溶液 6ml×1瓶,4℃保存 6个月。

组织样本的MPO测定:

(一)、样本前处理:

1、准确称取组织重量,以配好的试剂二溶液为匀浆介质,按重量体积比为1 ︰ 19  加匀浆介质制备成 5%的组织匀浆,不需要进行离心。

2、取5%组织匀浆 0.9ml  加 3 号试剂 0.1ml ,(如果组织匀浆量不够,可以按 9:1   的比例减少组织匀浆及 3号试剂的用量),充分混匀后 37℃水浴 15分钟,取出后待测。

(二)、操作表:

对照管

测定管

双蒸水(ml)

3

 

样本(ml)

0.2

0.2

试剂四(ml)

0.2

0.2

显色剂(ml)

 

3

混匀,37℃水浴 30分钟

试剂七(ml)

0.05

0.05

混匀,60℃水浴10分钟,取出后立即在460nm处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。

(三)、计算:

1、单位定义:每克组织湿片在37℃的反应体系中 H2O2被分解1 mol为 1 个酶活力单位。

2、计算公式:       


image.png


血清(浆)样本的 MPO测定

(一)、血清(浆)样本前处理:

1取血清(浆)与试剂二按1 ︰ 1 比例稀释,充分混匀。

2、取上面的混合液0.9ml加3号试剂 0.1ml(如果混合液量不够,可以按 9:1的比例减少混合液及 3号试剂的用量),充分混匀后37℃水浴15分钟。

(二)、操作表:

试剂空白(可以不做)

对照管

测定管

双蒸水(ml)

0.2

3

 

样本(ml)

 

0.2

0.2

试剂四(ml)

0.2

0.2

0.2

显色剂(ml)

3

 

3

混匀,37℃水浴 30分钟

试剂七(ml)

0.05

0.05

0.05

混匀,60℃水浴10分钟,取出后立即在460nm处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。

(三)、计算:

1、单位定义:每升血清(浆)在37℃的反应体系中 H2O2 被分解1 mol 为1个酶活力单位。

2、计算公式:   


image.png