髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒 ; 100管/48样
测定原理:
中性白细胞中存在有髓过氧化物酶,每个细胞所含的酶的量是一定的,约占细胞干重的 5%,该酶具有使过氧化氢还原的能力,利用这一特点可以分析酶的活力,并定量测定中性白细胞的数目。
其原理如下:
MPO+H2O2→复合物;复合物+AH2(供氢体)→H2O+MPO+A产物
通过供氢体邻连茴香胺供氢后生成黄色化合物,在460nm处通过比色测定A产物的生成量,从而推算出MPO的活力及H2O2 减少的量和白细胞的数目。
试剂组成与配制:
试剂一:缓冲贮备液35ml×1瓶,按需要量配成缓冲应用液,4℃保存 6个月。
缓冲应用液的配制:贮备液:双蒸水=1:9 ,4℃保存1个月。
试剂二:粉剂×2支,4℃保存6个月。临用时每支加缓冲应用液60ml溶解,可以 37℃加热溶解,4℃保存 2周。
[注]:若您所需测的是组织样本,并且除髓过氧化物酶之外,还需测其它项目时,此时每支试剂二粉剂需配成浓缩一倍的溶液,即每支试剂二粉剂加到缓冲应用液 30ml 中。
试剂三:粉剂×3支,溶剂 6ml×3支,4℃保存 6个月。用时1支粉剂倒入1支溶剂中溶解,最好提前一天配制,充分溶解后 4℃保存2周。
试剂四:溶液 24ml×1 瓶,天冷时会凝固,用前放入 37℃以上的水中摇晃使其溶解至透明 后方可应用,室温保存6个月。
试剂五:粉剂×2支, 4℃保存6个月。
试剂六:溶液 0.5ml×1支,4℃保存 6个月。
显色剂的配制:临用时将试剂五粉剂1支加到100ml缓冲应用液中,充分摇匀,待粉剂完全溶解后再加入试剂六 0.1ml,充分混匀,配好后的显色剂 4℃避光保存。
试剂七:溶液 6ml×1瓶,4℃保存 6个月。
组织样本的MPO测定:
(一)、样本前处理:
1、准确称取组织重量,以配好的试剂二溶液为匀浆介质,按重量体积比为1 ︰ 19 加匀浆介质制备成 5%的组织匀浆,不需要进行离心。
2、取5%组织匀浆 0.9ml 加 3 号试剂 0.1ml ,(如果组织匀浆量不够,可以按 9:1 的比例减少组织匀浆及 3号试剂的用量),充分混匀后 37℃水浴 15分钟,取出后待测。
(二)、操作表:
| 对照管 | 测定管 |
双蒸水(ml) | 3 | |
样本(ml) | 0.2 | 0.2 |
试剂四(ml) | 0.2 | 0.2 |
显色剂(ml) | | 3 |
混匀,37℃水浴 30分钟 |
试剂七(ml) | 0.05 | 0.05 |
混匀,60℃水浴10分钟,取出后立即在460nm处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。 |
(三)、计算:
1、单位定义:每克组织湿片在37℃的反应体系中 H2O2被分解1 mol为 1 个酶活力单位。
2、计算公式:

血清(浆)样本的 MPO测定
(一)、血清(浆)样本前处理:
1、取血清(浆)与试剂二按1 ︰ 1 比例稀释,充分混匀。
2、取上面的混合液0.9ml加3号试剂 0.1ml(如果混合液量不够,可以按 9:1的比例减少混合液及 3号试剂的用量),充分混匀后37℃水浴15分钟。
(二)、操作表:
| 试剂空白(可以不做) | 对照管 | 测定管 |
双蒸水(ml) | 0.2 | 3 | |
样本(ml) | | 0.2 | 0.2 |
试剂四(ml) | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
显色剂(ml) | 3 | | 3 |
混匀,37℃水浴 30分钟 |
试剂七(ml) | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
混匀,60℃水浴10分钟,取出后立即在460nm处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。 |
(三)、计算:
1、单位定义:每升血清(浆)在37℃的反应体系中 H2O2 被分解1 mol 为1个酶活力单位。
2、计算公式:
