铜－ATP酶(Cu-ATPase)检测试剂盒 ; 100管/50样
测定原理：
ATP酶可分解ATP生成 ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。Cu2+-ATPase酶是一种能被钾激活而可被钒酸抑制的酶。
试剂盒组成与配制：
试剂编号
试剂名称
100管/50样
保存条件
试剂一
液体
10ml×2瓶
4℃保存6个月
试剂二
10ml×1瓶
试剂三
7ml×1瓶
试剂四
粉剂
粉剂×3支
试剂四的配制：用时每支加双蒸水至5ml充分溶解，余下的-20℃以下可保存一周(不可反复冻融）
试剂五
粉剂×1支
试剂五的配制：用时每支加双蒸水至5ml可适当加热充分溶解
试剂六
溶剂
3ml ×1瓶
试剂六的配制：用时将一支粉剂倒入3ml溶剂中，充分溶解
试剂七
10ml ×1瓶
室温保存1年
试剂八
试剂八的配制：用时一支加双蒸水至40ml溶解，溶解后 4℃保存一周；
试剂九
粉剂×1瓶
试剂十
2.5mol/L硫酸
100ml×1瓶
室温保存6个月
试剂十一
10mmol/L标准磷贮备液
0.5μmol/ml标准磷应用液配制：按贮备液：双蒸水＝1︰ 19 的比例稀释，即取 0.5ml 贮备液加双蒸水定容至10ml。
定磷剂的配制：按H2O：2.5mol/L 硫酸：试剂八：试剂九＝2︰1︰1︰1的比例及先后顺序配制，配好的定磷剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若蓝色则为磷污染，定磷剂需现用现配, 需多少配多少。
(注意：配制试剂时，双蒸水、容器等要防止磷污染。)
操作步骤：
1、样本前处理：
准确称取组织重量，按重量（g）︰体积（ml）=1︰9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，制备成 10%的组织匀浆，2500转/分，离心10分钟，取得的上清液再用生理盐水按 1︰4稀释制备成 2%的组织匀浆。（具体操作见我所《实验方法学》）
2、酶促反应：
对照管
测定管
试剂一(μ l）
130
试剂二(μl）
80
试剂三(μl）
120
试剂四(μl）
40
试剂五(μl）
试剂六(μl）
样本(μl）
100
混匀，37℃准确反应10分钟
试剂七(μl）
50
混匀，3500转/分，离心10分钟，取上清400μl 定磷
3、定磷
管号
标准管
0.5μmol/ml标准磷应用(l）
400
上清液(l）
定磷剂(l）
2000
混匀，45℃水浴5分钟，冷却至室温，在660nm处，1cm光径，双蒸水调零，比色。
计算及举例：
