铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理:
铜兰蛋白(Ceruloplasmin,CP)催化联大茴香胺转变成淡黄棕色产物,加终止剂后形成紫红色溶液在540nm测定吸光度,根据产物的吸光系数可计算出酶的活力。
试剂组成与配制:
试剂一:醋酸缓冲液 60ml1瓶,4℃保存 3个月。
试剂二:基质液13ml×1瓶,4℃保存3个月。
试剂三:终止剂60ml×2瓶,4℃保存3个月。
操作步骤:
对照管*
测定管
血清(ml)
0.05
缓冲液(ml)
0.8
基质液(ml)
0.2
混匀,37℃水浴20分钟
终止剂(ml)
2.0
样本或双蒸水(ml)
混匀,室温放置5分钟后,540nm处、1cm光径比色皿,双蒸水调零,测各管吸光度值。
*对照管只需做 2~3管。(注:鸡血清不建议使用本方法)
计算:
1、单位定义:
反应液在最适pH及最适浓度下,每分钟催化转变反应体系中1μmo1底物的酶量为一个
活力单位。
2、计算公式:
[注]:*反应时间为10分钟,酶活力定义为1小时,故乘以6 **稀释倍数=130 +80+ 40 +40 + 40 +100 +50 =4.8倍