细胞丙二醛(MDA)检测试剂盒 ; 400T
试剂盒组成与配制(400T）：
400T
试剂组成
规格
保存条件
试剂一
澄清剂
25ml×1瓶
室温保存1年
试剂一天冷时会凝固，每次测试前适当水浴加温以加速溶解，直至透明方可应用
试剂二
贮备液
12ml×1瓶
4℃冷藏1年
剂二应用液的配制：用时每瓶加双蒸水 340ml 混匀，4℃冷藏。（注意不要碰到皮肤上）
试剂三
显色剂
60ml×2瓶
4℃避光冷藏1年
作液配制：试剂一：试剂二：试剂三=0.2：3 ：1的比例进行配制，现用现配，用多少配多少
试剂四
10nmol/ml标准品
1ml×1瓶
4℃密封冷藏1年
试剂五
提取液
250ml×1瓶
操作步骤：
1、样本前处理：弃去细胞培养上清，用细胞刮将细胞刮下，用移液器将细胞转移到塑料离心管中，加试剂五提取液0.5ml，混匀2分钟，将细胞破碎（可用玻璃匀浆器手动匀浆或者超声破碎）制成悬液，取样0.1ml于1.5ml离心管中（预先用酒精灯加热针头在管盖上刺一小孔）。
空白管
标准管
测定管
无水乙醇(μl)
100
10nmol/ml标准品(μl)
测试样品(μl)
1000
工作液(μl)
盖上盖，旋涡混匀器混匀，95℃以上水浴40分钟，取出后流水冷却，4000转/分钟离心10分钟，530nm，将酶标板空板进行扫描，准确吸取 0.25ml各管反应液加入到新的96孔板中，酶标仪测定各孔吸光度（计算时要减去空板读数）。
测试原理：
过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）可与硫代巴比妥酸(TBA)缩合，形成红色产物,在532nm处有最大吸收峰。因底物为硫代巴比妥酸（Thibabituric Acid TBA）所以此法称TBA法。
测定意义：
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid ，PUFA），引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。如：醛基（丙二醛 MDA）、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。
脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，即非自由基性的脂类分解产物，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。因此，初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成，这些分解产物中，一些是无害的，另一些则能引起细胞代谢及功能障碍，甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸（PUFA）的过氧化引起细胞损伤，而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。
MDA的测定常常与SOD 、XOD 、NO 、T-AOC 、MAO 、POD、脂褐质、FFA 、LPS、总酯酶、TG 、TC、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而 MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度，通过SOD与MDA 的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
