维生素C(VC)/ 抗坏血酸(AsA)含量检测试剂盒 ; 50管/48样
试剂盒组成及配制：
试剂一：贮备液5ml×1瓶，4℃保存6个月。
试剂一应用液配制：用时按照试剂一贮备液：双蒸水=1：14稀释，混匀制备。
试剂二：粉剂×1支，4℃保存6个月。
试剂二应用液配制：用时1支粉剂加0.36ml的冰醋酸再加水至40ml，溶解，4℃保存。
试剂三：白色结晶体的粉剂×1支，4℃保存 6个月。
试剂三应用液配制：因较难溶解，用前2～4小时加 95%酒精或无水乙醇60ml充分溶解制备，4℃保存。
试剂四：黄色贮备液 0.2ml×1瓶，冰箱 4～8℃避光保存，贮存时间 6个月。
试剂四应用液配制：用时取0.15ml试剂四贮备液加水至25ml制备。（现用现配）
试剂五：液体6ml1瓶，4℃保存6个月。
试剂六：Vc 标准品：粉剂6mg×3支，每瓶内含维生素C ，4℃避光保存6个月。
600g/ml Vc 标准品应用液配制：将1支标准品粉剂溶于10ml试剂一应用液中，制备。 6g/ml Vc 标准品应用液配制：取600g/ml Vc 标准品应用液再用试剂一应用液 100 倍稀释备用，现用现配。
注：维生素C标准品易氧化，因此，最好在样本上清液制备好后再配标准，并在10分钟内进行检测。
操作步骤：
1、上清液制备：取样本0.15ml加试剂一应用液0.45ml，旋涡混匀，放置15分钟后离心，3500～4000转/分，离心10分钟，上层清亮液体为上清液。
2、上清液中Vc的测定：
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
试剂一应用液(ml） | 0.4 | | |
6g/mlVc标准品应用液(ml） | | 0.4 | |
上清液(ml） | | | 0.4 |
试剂二应用液(ml） | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
试剂三应用液(ml） | 1 | 1 | 1 |
试剂四应用液(ml） | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
充分混匀，37 C水浴30分钟 |
试剂五(ml） | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
充分混匀，静置10分钟，波长536nm ，光径1cm（或0.5cm），双蒸水调零，处测各管吸光度值。 |
测定原理：
本法用Fe3+与还原型抗坏血酸迅速作用生成Fe2+，后者再与啡罗啉显色反应，可以测定血浆中维生素C的含量。
测定意义：
维生素C在体内参与胶原物质合成，是脯氨酸羟化酶和赖氨酸羟化酶的辅因子，是催化多巴胺转变成去甲肾上腺素的铜酶多巴β羟化酶所必需，当维生素C缺乏时，合成的胶原得不到充分的羟化，不能很好的形成纤维。
维生素C最明显的化学活性是作为还原剂，它可以将Fe3+还原成Fe2+，促使铁在肠道吸收，促进铁的贮存和利用。抗坏血酸作为自由基清除剂，可以很快1地与O2- 、H2O2反应，更快地与OH-反应生成抗坏血酸自由基，它也可以清除O2-，因此，抗坏血酸可以保护机体免受内源性氧自由基的损伤。
维生素C能与生育酚自由基还原成维生素E，间接地起着链阻断剂作用。维生素C是血浆中最有效的抗氧化剂，是细胞外液抗氧化防御系统的第一道防线，Vc对血浆中正在进行着的脂质过氧化作用也有阻断作用。
