腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒 ; 100管/48样
试剂盒组成:
腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase ,ADA)催化腺嘌呤核苷水解,产生次黄嘌呤核苷和氨,然后对产生的氨进行显色,从而可以计算血清ADA 的活性。
试剂组成及配制:
试剂一:粉剂×6支,稀释液5ml×6瓶,4℃保存,临用前2 小时每支粉剂用1瓶稀释液溶解。
试剂二:粉剂×2支,稀释液 100ml×2瓶,临用时每支粉剂用1瓶稀释液溶解即成,4℃避光保存。
试剂三:贮备液2ml×2瓶,稀释液100ml×2瓶。临用时每瓶贮备液用1瓶稀释液稀释即成,4℃避光保存,可稳定两个月。
试剂四:1mg氨氮/ml标准贮备液1ml×1瓶,4℃保存。
25µg氨氮/ml标准应用液的配制:取1mg氨氮/ml标准贮备液0.25ml用双蒸水定容至 10ml,充分混匀,现用现配。
操作表:
| 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
双蒸水(ml) | 0.02 | | | |
25µg氨氮/ml标准液(ml) | | 0.02 | | |
样本(ml) | | | 0.02 | 0.02 |
试剂一(ml) | 0.25 | 0.25 | 0.25 | |
混匀,37℃准确反应60分钟 |
试剂二(ml) | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
试剂一(ml) | | | | 0.25 |
试剂三(ml) | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
混匀,37℃水浴30分钟后,室温静置10分钟,波长640nm,㎝光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。 |
单位定义与计算公式:
(一)、血清中ADA酶活性的计算:
1、单位定义:
1ml血清在37℃和底物作用60分钟产生1µg氨氮为一个酶活性单位。
2、计算公式:
度活性(U/ml)= 标准OD值 - 空白OD值×(25μg氨氮/ml)
(二)、组织匀浆中ADA酶活性的计算:
1、单位定义:
每毫克组织蛋白在37℃和底物作用60分钟产生1µg氨氮为一个酶活性单位。
2、计算公式:
