总一氧化氮合成酶(NOS)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理：
NOS催化L-Arg和分子氧反应生成 NO，NO与亲核性物质生成有色化合物，在530nm 波长下测定吸光度，根据吸光度的大小可计算出NOS活力。
试剂组成及配制：
试剂一：底物缓冲液6ml1瓶，-20ºC以下避光冷冻保存3个月。临用前化冻摇匀。没有用完的试剂，可以-20ºC以下避光冷冻保存以备下次再用。
试剂二：促进剂淡黄色或白色粉剂2支，稀释液0.6 ml 2支。-20ºC以下冷冻保存6个月。测试前取稀释液一支0.6ml加入一支粉剂中充分混匀（即将1.5ml离心管反复颠倒，并将小离心管尖部的液体弹下来），测试后剩余的试剂可放入-20ºC以下冷冻保存，时间不超过一周。若发现粉剂变成黄褐色或咖啡色，则不可以再用。
试剂三：黄色显色剂3ml1瓶，4ºC避光冷藏保存3个月。
试剂四：透明剂3ml1瓶，室温保存 6个月。天冷后会凝固，37℃水浴变澄清时再使用。
试剂五：终止剂60ml瓶，4ºC保存6个月。室温低会出现浑浊，37℃水浴至透明再用。
操作步骤：
(注：样本及试剂从冰箱取出，37℃水浴至溶解完全，试剂四和试剂五必须澄清透亮，再进行操作，否则会影响结果)
| 空白管 | 总NOS测定管 |
双蒸水(μl) | a* | |
样本(μl) | | a* |
试剂一 底物缓冲液(μl) | 200 | 200 |
试剂二 促进剂(μl) | 10 | 10 |
试剂三显色剂(μl) | 100 | 100 |
混匀，37ºC水浴准确反应15分钟 |
试剂四透明剂(μl) | 100 | 100 |
试剂五终止液(μl) | 2000 | 2000 |
混匀，波长530nm，1cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。 |
[注] ：
1、a*为参考取样量及补足双蒸水的量，10%的大鼠肝组织50～100l，鼠血清30l，10%的大鼠肾匀浆50l，狗血清30 l，心肌培养液100l。
2、比色时注意管内有无结晶或混浊，若有结晶或混浊可放37℃水浴锅内轻轻搅动几下，混浊或结晶消失后再比色。
正常参考值：
大鼠血清：18.69±3.97 U/ml（n=45）
10%大鼠肾匀浆：0.536±0.134 U/ml（n=19）
狗血清：20.57±3.39 U/ml（n=18）
心肌培养液：0.698±0.110U/ml（n=12）
注意点：
1、促进剂最好现用现配，配好后尽量一日内用完，如有剩余则-20ºC以下保存不超过一周；未配制之前的2号促进剂和稀释液均应-20ºC以下保存，如淡黄色或白色粉末变成咖啡色或黄褐色颗粒则失效不可用。
2、NOS活性低，稳定性差，样品或匀浆上清如不马上检测，应置-20ºC以下冷冻保存。
3、试剂一与配制好的试剂二应避免反复冻融。
4、室温低时，NOS 5号会出现浑浊，如果已经在测试管中加入了NOS 5号，可将测试管对着灯光，观察有无结晶或浑浊。如果有结晶或浑浊，请将每只测试管37ºC水浴锅中晃动5分钟，再比色。
