乙酰胆碱转移酶(ChAT)检测试剂盒 ; 40管/20样
测定原理:
试管、微量移液器、旋涡混匀器、37℃水浴箱(气浴箱)、低速离心机、可见分光光度计(324nm)。
适用范围:
本试剂盒可测各种动物血清、血浆等样本中 ChAT 活性。
测定意义:
乙酰胆碱Ach是调节食道平滑肌运动的主要的兴奋性神经递质。食道平滑肌收缩主要是由于Ach释放引起。而乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase ChAT)和乙酰胆碱脂酶(Acetylcholinesterase ACHE)分别是 Ach的合成酶和水解酶,调节Ach的代谢。食道组织中这两个酶的活力代表了食管内源性胆碱能神经功能状态。
乙酰胆碱是延髓脊髓运动神经元,自主神经系统神经节前纤维,神经节后胆碱能(副交感神经)纤维,以及中枢神经系统内许多神经元(例如基底节,大脑运动区皮层)的主要神经递质。
它是通过胆碱乙酰转移酶的作用,由胆碱与来自线粒体的乙酰辅酶A所合成。在获得释放后,乙酰胆碱刺激特殊的胆碱能受体,这种相互作用很快被局部的胆碱酯酶所终止,后者使乙酰胆碱被水解为胆碱与乙酸盐。乙酰胆碱的水平由胆碱乙酰转移酶和胆碱的摄取所调控。
操作过程:
测定管
对照管
试剂一(μl)
52.5
试剂二(μl)
2.5
试剂三(μl)
5
试剂四(μl)
试剂五(μl)
试剂六(μl)
混匀,37 °C 水浴预温5分钟
5%的组织匀浆上清(1)
10
煮沸的匀浆上清10
混匀,37 °C 水浴 20 分钟,100 °C 沸水水浴 2 分钟终止反应
蒸馏水(l)
425
混匀,4000 r/min×10min 离心后取上清进行显色反应
上清(l)
450
试剂七(l)
静置15分钟,在324nm处,用1cm 光径,2mm内径的石英比色皿, 蒸馏水调零,测定各管的吸光度值。
计算公式: