抑制与产生超氧阴离子自由基检测试剂盒 ; 50管/48样
试剂组成与配制：
试剂一：液体5ml×1瓶（天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需热水浴溶解后再用）；试剂一应用液的配制：用时每瓶5ml贮备液加双蒸水稀释至50ml ，4℃保存1年。
试剂二：液体5ml×1瓶，4℃保存1年。
试剂三：液体5ml×1瓶，4℃保存1年。
试剂四：贮备液350μl×1支，-20℃保存；稀释液5ml×1瓶，4℃保存半年。
试剂四应用液的配制:按贮备液:稀释液=1∶14比例配制，现用现配，4℃保存，不可冷冻。
试剂五：粉剂×1支，用时加70～80℃热双蒸水37.5ml溶解。配好后4℃避光保存。
试剂六：粉剂×1支，用时加双蒸水37.5ml溶解后备用，配好后的试剂4℃避光保存。
显色剂的配制：按照5号试剂︰6号试剂︰冰乙酸=3︰3︰2 的体积比配成显色剂，4℃避光保存3个月（冰乙酸自备）。
试剂七：Vc标准品×4支。
Vc 标准贮备液配制：将一支Vc标准品加双蒸水定容至 5ml（Vc标准配制后当天内使用）0.15mg/ml Vc标准品应用液配制：取1ml贮备液加4ml双蒸水，5倍稀释现用现配。
[注]：Vc标准品配置后见光极易分解，配制的0.15mg/ml Vc标准应用液需30分钟内检测冰乙酸（分析纯，乙酸浓度≥99.5%）
操作表：
| 对照管 | 标准管 | 测定管 |
试剂一应用液(ml） | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
双蒸水(ml） | 0.05 | | |
0.15mg/ml Vc标准品(ml） | | 0.05 | |
样品(ml） | | | 0.05 |
试剂二(ml） | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
试剂三(ml） | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
试剂四应用液(ml） | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
用旋涡混匀器充分混匀，置37℃恒温水浴40分钟 |
显色剂(ml） | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
混匀，静置10分钟，双蒸水调零，1cm光径，波长550nm比色。 |
三、计算公式及举例：（因各种物质不同，则定义及计算公式也不一样，具体如下：)
(一）血清（浆）中抗超氧阴离子自由基活力单位的公式及计算：
1、定义：
在反应系统中，每升血清（浆）在 37℃反应 40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于 1mg的维生素 C 所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。
2、计算公式：
(二）组织中抗超氧阴离子自由基活力单位的公式及计算：
1、定义：
在反应系统中，每克组织蛋白在 37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于 1mg的维生素 C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。
2、计算公式：
四、本法尚可检测产生超氧阴离子的改变，例如白细胞，某些中西药物等。其计算公式如下：
1、定义：
在反应系统中，每升（克）物质在 37℃反应40分钟所产生的超氧阴离子自由基相当于1mg 的维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。
2、计算公式：
公式一：产生超氧阴离子= 测定 OD 值 一 对照 OD 值 × 活力单位 (U/L ) 对照 OD值 一 标准OD值
公式二：产生超氧阴离子=测定OD值 一 对照 OD 值×活力单位 (U/g) 对照OD 值 一 标准OD值
标准品浓度 | | 样品测试前 |
(0.15mg/ml) | ×1000ml× | 的稀释倍数 |
标准品浓度 | | 样本浓度 |
0.15mg/ml) | ×1000ml÷ | (g/L) |
测定原理：
模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统，产生超氧阴离子自由基，加入电子传递质及gress氏显色剂，使反应体系呈现紫红色，可用分光光度计测其吸光度，当被测样本中含有超氧阴离子自由基抑制剂时，则比色时测定管的吸光度低于对照管的吸光度，而如果被测样本中含有产生超氧阴离子自由基物质时，则比色时测定管的吸光度高于对照管的吸光度，通过以维生素C 做标准，可计算出被检物品对超氧阴离子自由基的影响能力。
