游离脂肪酸(NEFA)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理:
游离脂肪酸(NEFA)能与铜离子结合形成脂肪酸的铜盐而溶于氯仿中,其含量与游离脂肪酸含量成正比。用铜试剂测定其中铜离子的含量,即可推算出游离脂肪酸的含量。
试剂组成与配制:
试剂一:氯仿(三氯甲烷)(分析纯)自备。
试剂二:缓冲液,40ml×1瓶,室温保存6个月。
试剂三:铜试剂,甲液30ml×1瓶,乙液30ml×1瓶,丙液5ml×1瓶,4℃保存 6个月。试剂三铜试剂的配制:按甲液∶乙液∶丙液=10∶9 ∶ 1 的比例进行配制,需多少配多少,配好后 4℃保存二周。
试剂四:显色剂,粉剂×2支,稀释液 10ml×2瓶,4℃保存3个月。
试剂四显色剂的配制:临用时将1支粉剂溶解于1瓶10ml稀释液中,配好后4℃可保存二周。
试剂五:棕榈酸标准品粉剂×2支,溶剂50ml×1瓶,4℃保存1个月。
1000µmol/L棕榈酸标准品的配制:将一支粉剂用溶剂溶解后定容至20ml
试剂六:双蒸水40ml×1瓶(做空白管用)。
操作步骤:
空白管
标准管
测定管
双蒸水(ml)
0.2
1000µmol/L棕榈酸标准品(ml)
待测样本(ml)
试剂二缓冲液(ml)
0.5
试剂三铜试剂(ml)
1.0
试剂一(ml)
4.0
充分混匀抽提2分钟,3500转/分离心10分钟,仔细吸去上层蓝色液体及蛋白凝块弃之,吸取下层抽提液2ml进行显色。
下层抽提液(ml)
2.0
显色剂(ml)
0.25
混匀,室温放置2分钟,在440nm ,1cm光径,试剂一调零比色。
计算公式: