植物丙二醛(MDA)检测试剂盒 ; 48T
试剂盒组成与配制：
48T | 试剂组成 | 48T | 保存条件 |
试剂一 | 澄清剂 | 3ml×1瓶 | 室温保存1年 |
试剂一天冷时会凝固，每次测试前适当水浴加温以加速溶解，直至透明方可应用 |
试剂二 | 缓冲液 | 45ml×1瓶 | 4℃冷藏1年 |
试剂三 | 显色剂 | 15ml×1瓶 | 4℃避光冷藏1年 |
工作液配制：试剂一：试剂二：试剂三=0.1：3 ：1的比例进行配制，现用现配，用多少配多少 |
试剂四 | 10nmol/ml标准品 | 1ml×1瓶 | 4℃密封冷藏1年 |
试剂五 | 贮备液（10倍浓缩） | 20ml×1瓶 | 4℃密封冷藏1年 |
试剂五应用提取液的配制：试剂五贮备液：双蒸水＝1：9的比例配制成应用提取液附赠96孔板×1块；盖子上带孔的离心管60只 |
操作步骤：
1、样本前处理：准确称取植物组织重量，按重量体积比 1：9加入 9 倍体积的试剂五应用提取液（如 0.1g植物组织+0.9ml 的试剂应用提取液），剪碎后用内切式匀浆机冰水浴匀浆，8000～10000 转/分，每次10~ 15秒，间歇 30秒，共 3～5 次，再将匀浆吸入到离心管中，3500～4000 转/分，离心10分钟，取上清待测。
2、编号：对赠送给你的盖子上带孔的离心管进行编号，并用它加样加试剂进行操作
3、操作表：
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
无水乙醇(μl） | 50 | | |
10nmol/ml标准品(μl) | | 50 | |
待测样本(μl） | | | 50 |
工作液(μl） | 2000 | 2000 | 2000 |
盖上盖，旋涡混匀器混匀，95℃以上水浴20分钟，取出后流水冷却，530nm，将酶标板空板进行扫描，准确吸取0.25ml各管反应液加入到新的96孔板中，酶标仪测定各孔吸光度（计算时要减去空板读数）。
注意点：
1、部分样本中MDA含量较低，可将操作表中的空白管、标准管、测定管的取样量均加大到100μl进行测定。
2、附送盖子上带孔的EP管60个，直接编号后用于操作。
3、水浴时间及温度要固定，反应时间到后立即用流水冷却。冷却后呈色稳定，12小时内吸光度基本不变。
4、沸水浴20分钟，流水冷却后，转入96孔板中的液体量一定要准确，并且不能有气泡。如有气泡可以放一些时间等气泡消失后再测。（最好先将酶标板空板进行扫描）
5、如没有酶标仪，可以用微量比色皿在分光光度计上进行测定。
测定意义：
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid ，PUFA）， 引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。如：醛基（丙二醛 MDA）、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，即非自由基性的脂类分解产物，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。
因此，初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成，这些分解产物中，一些是无害的，另一些则能引起细胞代谢及功能障碍，甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸（PUFA）的过氧化引起细胞损伤，而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。
因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。 MDA的测定常常与SOD的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而MDA 的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度，通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
