总谷胱甘肽(T-GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒 ; 48T
测定原理:
利用DTNB的循环反应,测定组织和体液中的总谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的含量。
试剂盒组成和配制:
样本测试前处理:
详见试剂盒内说明书
操作过程:
1、T-GSH的测定步骤:
T-GSH操作步骤表
标准管
测定管
50 μmol/L GSH标准品(μl)
10
样本(μl)
试剂一 (μ l)
100
试剂二(μl)
混匀后,室温(25℃)静置2分钟
试剂三(μl)
50
加试剂三的同时开始计时,轻轻摇动酶标板使试剂充分混匀,置酶标仪中,405nm处,30秒时准时读取吸光度值(A1),室温(25℃)静置10分钟,10分30秒时准时读取吸光度值(A2)。
2、GSSG 的测定步骤:
①、前处理:
GSSG操作步骤表
试剂名称
50μmol/L GSSG标准品(μl)
试剂五(μl)
2
试剂六(μl)
5
漩涡混匀 1 分钟,37℃反应30分钟,然后取样10μl进行测定
②、GSSG含量测定:
标准前处理液(μl)
样本前处理液(μl)
试剂一(μ l)
板使试剂充分混匀,置酶标仪中,405nm处,30 秒时准时读取吸光度值(A1),室温(25℃)静置10分钟,10分30秒时准时读取吸光度值(A2)。
计算公式:
还原型谷胱甘肽(GSH)含量 = T-GSH含量- 2×GSSG含量