血清总铁结合力(TIBC)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定原理:
血清内加入过量的铁,使血清中运铁蛋白全部与铁结合。再加入铁的吸附剂将多余的铁吸附掉。然后用测血清铁的方法测定铁的含量,此量称为总铁结合力(TIBC),由 TIBC 减去血清铁值,则称为未饱和铁结合力(UIBC)。
试剂组成与配制:
试剂一:
100mg/L(1791mol/L)铁标准贮备液 6ml×1瓶,4℃保存3个月。10mg/L(179.1 mol/L)的铁标准应用液的配制:取贮备液10倍稀释,即取5ml铁贮备液加双蒸水稀释至 50ml。
1mg/L(17.91mol/L)的铁标准应用液的配制:
取10mg/L铁标准应用液10倍稀释,即1ml 10mg/L(179.1mol/L)铁标准应用液加双蒸水稀释至10ml。
试剂二:
铁吸附剂 50mg×50支,4℃保存6个月。
铁显色剂:
3号甲粉剂一支,3号乙粉剂一支,3号丙液100ml×1瓶,4℃保存 6个月。用时将甲、乙二粉剂倒入丙液中,充分混匀、溶解,即为铁显色剂,4℃~8℃避光保存。
操作过程:
1、样本前处理:
取血清(浆)1ml 加入179.1mol/L铁标准液1ml混匀,放置10分钟后,加入铁吸附剂 50mg,混匀,室温放置 5分钟,再混匀一次,共混匀四次,3000~ 3500转/分,
离心10分钟(台式离心机),取上清1ml,按操作表操作。
2、操作表:
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
双蒸水(ml) | 1 | | |
1mg/L(17.91mol/L)铁标准应用液(ml) | | 1 | |
上清(ml) | | | 1 |
铁显色剂(ml) | 2 | 2 | 2 |
取上清液 1.5ml ,0.5cm 光径,波长 520nm,双蒸水调零,测各管吸光度(OD值)。 |
计算公式及举例:
1、计算公式:
TIBC = 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度 × 样本测试前
(mg/L) 标准OD值-空白OD值 (1mg/L) 稀释倍数(2 倍)
TIBC = 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度 × 样本测试前
(μmol/L) 标准OD值-空白OD值 (17.91μmol/L) 稀释倍数(2倍)
UIBC(μmol / L) = TIBC - 血清铁 铁饱和度 = 血清铁 ÷ TIBC × 100%