β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)检测试剂盒 ; 100管/96样

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)检测试剂盒 ; 100管/96样

测定意义： 

β-GD 广泛存在于动物组织中，是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶，具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富，测定胃液 β-GD 活性对于研究胃癌具有重要的意义。

测定原理： 

β-GD 催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞，通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体 100mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体 2mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂仍-20℃保存；

试剂三：液体15mL×1瓶，4℃保存；

试剂四：1μmol/mL标准储备液10mL ，4℃保存；

样品测定的前处理：

按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零；

2、样本测定

注 意：标准管和空白管只需测一次。

β-GD 活性计算：

(1) 按样本蛋白浓度计算

      单位定义：

      每小时每 g 鲜重样品中催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。

      β-GD(μmol/h/g鲜重) =(C标准管 ×V1)×( A测定管 -A空白管)÷( A标准管 -A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A测定管-A空白管)÷(A

      标准管-A空白管)÷W

(2) 按样本蛋白浓度计算

      单位定义：

      每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。

      β-GD(μmol/h /mg prot)=(C标准管 ×V1)×( A测定管 -A空白管)÷(A标准管-A  空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×(A测定管-A空白管)÷(A

      标准管-A空白管)÷CprC 标准管：标准管浓度， 1μmol/mL；V1 ：加入样本体积：0.01mL；V2 ：加入提取液体积，1mL；T：反

      应时间，0.5h；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。