山梨醇含量检测试剂盒 ; 100管/96样
测定意义：
山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是糖运输形式之一，而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。因此，在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。
测定原理：
山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在 655nm 波长有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 3.5mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体 3.5mL×1瓶 ，4℃保存。
山梨醇的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1 ：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水），研磨成匀浆，95℃水浴10分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心10min，取上清液待测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至655nm，蒸馏水调零。
2、加样表（在 EP 管中依次加入下列试剂）：
试剂(μL） | 空白管 | 测定管 |
试剂一 | 35 | 35 |
试剂二 | 35 | 35 |
样本 | | 230 |
蒸馏水 | 230 | |
混匀后室温静置 15min，8000g，25℃离心 10min，取 200μL 上清液至微量石英比色皿或 96 孔板中，测 655nm下吸光值 A ，计算 ΔA=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。 |
山梨醇含量计算：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下:
测定回归方程为 y = 0.352x - 0.002；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
2、按照样品质量计算：
山梨醇含量(mg/g鲜重)＝[(ΔA＋0.002)÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=2.84×(ΔA＋0.002)÷W。
3、按照样本蛋白浓度计算:
山梨醇含量(mg /mgprot)＝[(ΔA＋0.002)÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷CprV1：加入样本体积，0.23mL；V2：
加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
1、标准条件下:
测定回归方程为 y = 0.176x - 0.002；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
2、按照样品质量计算:
山梨醇含量(mg /g鲜重)＝[(ΔA＋0.002)÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002)÷W。
3、按照样本蛋白浓度计算:
山梨醇含量(mg/mg prot)＝[(ΔA＋0.002)÷0.176×V1]÷(V1×Cpr)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷CprV1：加入样本体积，0.23mL；V2 ：
加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注 意：最低检测限为1μg/g 鲜重或 0.01μg /mg prot
