葡萄糖含量检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义：
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
测定原理：
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505 n有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：试剂一：0.5μmol/mL葡萄糖溶液 10mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体 25ml×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体 25ml×1瓶，4℃保存；（若出现结冰现象，可 37℃水浴溶解后使用）
葡萄糖提取：
1、组织的处理：按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水），研磨成匀浆，95℃水浴 10 分钟（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g ，25℃离心10min，取上清液备用。
2、混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合，用多少配多少。
3、加样表（在 EP 管中加入下列试剂）：
试剂(μL） | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
样本 | | | 100 |
试剂一 | | 100 | |
蒸馏水 | 100 | | |
混合试剂 | 900 | 900 | 900 |
混匀，置 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴中，保温 15min ，于 505nm 波长处读取吸光度。空白管、标准管和测定管吸光值分别记为 A1 、A2 和 A3。空白管和标准管只要做一管 |
葡萄糖含量计算：
1、按样本蛋白浓度计算:
葡萄糖含量(µmol/mg prot)=(C标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)÷Cpr。
2、按样本鲜重计算:
葡萄糖含量(µmol/g鲜重)= (C标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
3、按细菌或细胞密度计算:
葡萄糖含量(µmol/ 10⁴cell)= (C标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(500×V1÷V2)=0.001×(A3-A1)÷(A2-A1)C 标准：标准管浓度，
0.5µmol/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2 ：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；
500:细菌或细胞总数，500 万。
注 意：
1、最低检测限为50nmol/g 鲜重或0.5nmol/mg prot。
2、若样本中存在葡萄糖氧化酶抑制剂，则会造成测定结果偏低，建议改用 HPLC 法测定。
