类黄酮糖基转移酶(UFGT)检测试剂盒 ; 100管/96样
测定意义：
花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素，属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中，使其呈现由红到紫等不同颜色，是植物主要的呈色物质。类黄酮糖基转移酶（UDP-glycoseflavonoid glycosyltransferase, UFGT）是花色苷合成过程的最后一个酶，可以把不稳定的花色素催化成花色苷，在一定范围内，UFGT 活性与花色素苷的合成呈现正相关。
测定原理：
UFGT催化UDPG 与槲皮素生成UDP；UDP在丙酮酸激酶与乳酸脱氢酶作用下，氧化NADH为NAD⁺， NAD⁺生成速度与UDP含量成正比，通过340nm吸光度下降速度反映UFGT 活性。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂× 1瓶，-20℃避光保存；临用前加入20mL试剂四溶解；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；
试剂三：液体 100 μL×1管，4℃避光保存；
试剂四：液体 50mL×1瓶，4℃保存。
样品测定的准备：
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1 ：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），冰浴中匀浆。10000g ，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、在EP 管中加入如下试剂
2、工作液配制：在试剂二中加入20mL试剂四溶解，再加入20μL试剂三，混匀待用。用不完的工作液分装后-20℃保存一个月，禁止反复冻融。
3、在96孔板中加入如下试剂
反应液 | 20 |
工作液 | 180 |
混匀，测定 340nm 下 1min 时吸光值 A1 与 6min 时吸光值 A2，Δ A=A1-A2。 |
UFGT活力计算：
1、按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：
每mg组织蛋白每分钟催化1nmolNADH定义为一个酶活力单位。
UFGT活力(nmol/min/mg prot)=ΔA×V反总÷(ε×d)×10⁹÷(V样×Cpr)÷T×10=134×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算：
单位的定义：
每g组织每分钟催化1nmol NADH定义为一个酶活力单位。
UFGT活力(nmol/min/g鲜重)=ΔA×V反总÷(ε×d)×10⁹÷(W×V样÷V样总)÷T×10 =134×ΔA÷WV 反总：反应体系总体积，
0.2mL；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×10³L/mol/cm；d：96孔板光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.02 mL；V样总：加
入提取液体积，1mL；T：反应时间，240 min；10，稀释倍数；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量。
