苯丙氨酸解氨酶(PAL)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义：
PAL（EC4. 3 1 5）广泛存在于各种植物和少数微生物中，是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶，与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关，在植物正常生长发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。
测定原理：
PAL催化 L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值，通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体 40mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×3瓶，4℃保存。临用前每瓶加入4mL蒸馏水水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体 2.5mL×1瓶，4℃保存；
样本处理：
按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为1 ：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
试剂名称(μL） | 测定管 | 对照管 |
样品 | 20 | |
试剂一 | 780 | 800 |
试剂二 | 200 | 200 |
混匀，30℃ 准确水浴 30min |
试剂三 | 40 | 40 |
混匀，静置 10min 后，290nm 处记录测定管吸光值 A1 和对照管吸光值 A2，△A=A1-A2。 |
注 意：对照管只要做一管。
PAL活性计算：
(1) 按蛋白浓度计算
单位定义：
每mg组织蛋白在每mL反应体系中每min使290nm下吸光值变化 0.1为一个酶活性单位。
PAL(U/mg prot)= ΔA×V反总÷(Cpr×V样)÷0.1÷T=17.3×ΔA÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位定义：
每g组织每mL反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W×V样÷V样总)÷0.1÷T =17.3×ΔA÷WV反总：反应体系总体积，1.04mL； V样：加入样本体积，
0.02mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min ；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
