植物花色苷检测试剂盒 ; 100管/96样
测定意义：
花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素，属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中，使其呈现由红到紫等不同颜色，是植物主要的呈色物质。
测定原理：
采用pH示差法测定花色苷含量，当pH为1.0时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当 pH为4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式, 在530处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同pH下的530nm和700nm处的吸光度值。pH示差法减少了溶液pH和溶剂差异的影响，排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96孔板、超声波清洗器、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 100 mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体 20 mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体 20 mL×1瓶，4℃保存；
花色苷的提取：
按照样品质量(g)：提取液体积(mL)为1 ：5~10的比例（建议称取约0.1g样品，加入1mL提取液），充分匀浆后转移到EP管中，提取液定容至1 mL，盖紧后超声波提取2h，8000 g，常温离心10min，取上清液待测。
测定步骤：
1、酶标仪预热30min以上；试剂一和试剂二 25℃（室温）预热10min以上。
2、取20µL上清液和180µL试剂一（相当于稀释10倍），40℃水浴20min，分别测定530nm和700nm处的吸光值，分别记为A1和A2
3、取20µL上清液和180 µL试剂二（相当于稀释10倍），40℃水浴20min，分别测定 530nm和700nm处的吸光值，分别记为A3和A4 。
4、计算△A=(A1-A2)-(A3-A4)
注 意：如果A1大于1，可以适当加大稀释倍数，保证总体积 200µL不变，如10µL上清液和 190µL试剂一（相当于稀释20倍）；如果A1小于0.1，可以适当缩小稀释倍数，保证总体积不变，如100 µL上清液和100 µL试剂一（相当于稀释2倍），使A1保持在0.1~1范围内，可提高检测灵敏度；同样调整上清液和试剂二体积比例；计算时以实际稀释倍数代入下述公式中。
花色苷含量计算：
花色苷含量(µg/g鲜重)=[ ΔA×V÷(ε×d)×M×F×10⁶]÷W=33.4×ΔA×F÷WV：提取液体积，1×10-³L，ε：花色苷的摩尔消光系数，2.69×10⁴L/mol/cm；d：96 孔板光径，0.5cm ；M：花色苷的相对分子质量：449.2g/mol；F：稀释倍数；106：1g=106µg；W：样本干重：g，A线性范围为 0.005-0.5。
