上海源桔生物人CXC趋化因子配体2(CXCL2,GROβ)ELISA试剂盒样品采集及保
适用样本:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆、胸腹水/关节积液等体液;仅供科研,不用于临床诊断
一、各类样品采集与前处理
血清:
1. 使用无热原、无内毒素血清采血管采血;
2. 室温静置凝固 30 min(或 4℃过夜);
3. 4℃,1000×g 离心 15 min,小心吸取上层血清,避免吸取红细胞;
4. 样本严禁溶血、重度脂血,溶血会造成 HRP 非特异干扰,结果失真。
血浆:
1. 推荐抗凝:EDTA、肝素(部分试剂盒柠檬酸钠可用,以试剂盒说明书为准);
2. 采血后30 min 内,4℃,1000×g 离心 15 min;
3. 分离血浆,弃沉淀;
提示:采血后及时离心,防止细胞释放蛋白酶降解 CXCL2。
细胞培养上清:
1. 收集培养液至离心管;
2. 4℃,1000×g 离心 10~20 min,去除细胞、碎片;
3. 取上清;禁止添加叠氮钠(NaN₃),NaN₃抑制 HRP,直接假阴性。
组织匀浆:
1. 预冷 PBS(0.01 mol/L,pH7.0–7.4)漂洗组织,去除残血;冰上操作;
2. 组织称重剪碎,按质量体积比 1:9~1:50 加入预冷 PBS / 匀浆缓冲液冰上充分匀浆;
3. 4℃,3000×g 离心 15 min,收集上清;可同步 BCA 测总蛋白用于结果归一化。
5. 其它体液(胸腹水、关节液等)
4℃,1000×g 离心 20 min 去除细胞与悬浮物,取上清,处理方式同细胞上清。
二、样品保存规范(核心:分装,杜绝反复冻融)
1. 短期(1 周内检测):2~8℃冷藏;超过一周不建议 4℃存放,CXCL2 易降解;
2. 中期(1 个月内检测):按单次实验用量分装至 EP 管,-20℃冻存;
3. 长期(≤6 个月):分装后-80℃保存,稳定性更佳;
4. 解冻:室温缓慢融化,不要 37℃高温水浴快速加热;融化后混匀,若有沉淀可再次短时离心;反复冻融≤2~3 次,多次冻融 CXCL2 蛋白活性明显下降。
三、关键注意事项
1. 采集全程尽量冰上 / 低温操作,减少趋化因子降解;
2. 血清 / 血浆样本常存在基质效应,多数试剂盒推荐1:2 预稀释,建议做预实验确定稀释倍数;
3. 浑浊样本检测前再次离心去除微粒;
4. 本为通用说明书汇总,正式实验以购买试剂盒原厂说明书为第一标准。
上海源桔生物是一家集科研、生产、销售为一体的生物高新技术企业,以科研试剂生产、诊断试剂原料供应为核心,致力于为全球来自高等院校、政府研究机构、诊断试剂生产厂家以及生物公司的广大客户们提供高质量生物产品。
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