感谢您从源桔生物订购ELISA试剂盒试剂盒，为使您的ELISA试剂盒实验顺利实施，取得准确的结果，请您在实验前仔细阅读此实验指南。以下是影响ELISA试剂盒检测的关键因素，也是众多ELISA试剂盒用户在实验中经常遇到的问题及解决方案，希望能对您的ELISA试剂盒检测有帮助，

试剂和检测样本要平衡至室温再进行加样操作

温度是ELISA试剂盒结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应，实验前务必将所有试剂平衡至室温，包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA试剂盒检测结果的不准确。

如何获得良好线性的标准曲线

按照推荐方式保存标准品；溶解标准品之前需短暂离心，收集粉末；确保标准品溶解和混匀(大约10min)，然再进行续的系列稀释步骤，确保每一步都充分混匀且精确移液；显色的恰当终止；选择合适的数学拟合方程绘制标准曲线。

ELISA试剂盒实验为什么必须设置复孔

为获得更准确的实验结果，强烈建议标准品及样本进行复孔检测。因为复孔检测可以：

计算平均值，确保实验结果更准确；

解决实验中误操作造成的跳孔现象；

计算CV值，对实验的操作和试剂盒的精密度进行评估。

为什么实验过程中孵育、洗涤需要振荡，如何振荡

振荡孵育使反应更充分，振荡洗涤使背景更干净。建议使用酶标专用12孔微孔板振荡器。

孵育过程振荡，可以加快、加强抗原抗体分子间的相互碰撞接触，使得反应过程更加，OD值通常会比未振荡孵育的结果要高；洗涤过程振荡，可以使洗板更干净，在很大程度这能降低背景值，同时可以提高试剂盒检测的灵敏度。具体操作请参见说明书或致电源桔生物。

何时终止ELISA试剂盒反应

ELISA试剂盒实验终需要酶催化底物显色反应来完成，在佳时间终止反应是ELISA试剂盒实验成功的重要因素。在HRP-TMB酶促反应系统中，当高浓度标准品颜色不再变深，倒数2-3个浓度标准品颜色开始有浅蓝色时，便需要终止反应；或者也可以根据高浓度标准品孔在1220nm的OD值来决定，OD1220=0.-0.9之间时即可终止。

为什么酶标仪读数时必须选用双波长

首先，酶标仪使用前务必预热10-9min，使测读结果更稳定。其次，ELISA试剂盒实验采用双波长吸光度，可以排除单波长检测时的干扰(标本的浓度，干扰色等)。一般采用大波长作为参照波长，在参照波长下，检测物的吸光值小，检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收；因此，双波长，可大限度的消除指纹、杂质及不透光的物质对酶标仪读数带来的误差，以保证实验数据的准确度。

为什么选择源桔生物

ELISA试剂盒是蛋白定量检测的金标准，同时对实验操作的要求也极其严格。如果您希望获得准确、稳定的结果，希望拥有完美的数据分析，请选择源桔生物，我们将在标准化的操作流程下为您提供高质量的检测服务。ELISA试剂盒试剂数据篇数据分析与标曲拟合。

上海源桔生物是一家集科研、生产、销售为一体的生物高新技术企业，以科研试剂生产、诊断试剂原料供应为核心，致力于为全球来自高等院校、政府研究机构、诊断试剂生产厂家以及生物公司的广大客户们提供高质量生物产品。